[1]张敏,储三军,曾繁星,等. Bevacizumab对视网膜色素上皮细胞纤维化相关因子表达的影响[J].眼科新进展,2014,34(4):318-321.[doi:10.13389/j.cnki.rao.2014.0086]
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 Bevacizumab对视网膜色素上皮细胞纤维化相关因子表达的影响
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《眼科新进展》[ISSN:1003-5141/CN:41-1105/R]

卷:
34卷
期数:
2014年4期
页码:
318-321
栏目:
实验研究
出版日期:
2014-04-05

文章信息/Info

作者:
 张敏储三军曾繁星徐海峰
 250022 山东省济南市,济南大学,山东省医学科学院医学与生命科学学院,山东省眼科研究所
关键词:
 Bevacizumab视网膜色素上皮细胞纤维化细胞因子
DOI:
10.13389/j.cnki.rao.2014.0086
文献标志码:
A
摘要:
 目的 观察Bevacizumab对人视网膜色素上皮细胞纤维化相关因子基因及蛋白表达的影响,探讨Bevacizumab在新生血管纤维化中的作用。方法 用含终浓度0.25 g·L-1Bevacizumab的 DMED/F12培养液培养 ARPE-19细胞,按 Bevacizumab处理的时间分为0 h、6 h、12 h、24 h和48 h共5组,0 h为对照组。不同时间点收集细胞及上清。用逆转录聚合酶链反应检测ARPE-19细胞中结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowth fac-tor,bFGF)、转化生长因子-β2(transforminggrowth factorβ2,TGF-β2)和基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase2,MMP-2)的mRNA相对表达量。采用ELISA检测上清中CTGF、bFGF和 TGF-β2的蛋白浓度,应用免疫蛋白印迹法(W estern blotting)检测MMP-2蛋白的表达。结果 Bevacizumab作用后6h、12h、24h和48h,CTGF、bFGF、TGF-β2及MMP-2的mRNA相对表达量分别为CTGF:1.694±0.160、1.994±0.221、1.733±0.057、1.397±0.075,bFGF:1.720±0.068、2.144±0.080、1.893±0.068、1.372±0.076,TGF-β2:1.356 ±0.070、1.737 ±0.515、1.576 ±0.098、1.439 ±0.050,MMP-2:1.414 ±0.115、1.644 ±0.094、1.435±0.075、1.285±0.024,与对照组相比均升高,差异均有统计学意义(均为 P <0.05)。ELISA 结果显示 Bevacizumab作用后6h、12h、24h和48h,CTGF 、bFGF、TGF-β2蛋白的表达量与对照组相比均升高,差异均有统计学意义(均为P <0.05);对照组及各时间组蛋白浓度分别为CTGF:(31.949 ±0.388)ng·L-1、(48.697 ±0.863)ng·L-1、(56.847 ±0.499)ng·L-1、(51.753±1.395)ng·L-1、(43.085±1.240)ng·L-1,bFGF:(26.660±1.360)ng·L-1、(46.529±3.297)ng·L-1、(55.883±1.705)ng·L-1、(47.937±1.303)ng·L-1、(36.894±2.532)ng·L-1,TGF-β2:(26.982±2.404)ng·L-1、(35.452±1.360)ng·L-1、(46.787±0.896)ng·L-1、(43.683±1.630)ng·L-1、(38.008±1.110)ng·L-1。W estern blotting结果显示,Bevaci-zumb处理后6 h、12 h、24 h、48 hMMP-2蛋白含量升高,组间比较差异有统计学意义(F =2620.429,P =0.000)。结论 Bevaci-zumab能够上调人RPE细胞中CTGF、bFGF、TGF-β2及MMP-2的表达,可能有促纤维化形成的作用。

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更新日期/Last Update: 2014-04-04